Fabricação de eletrodos de óxido de grafeno induzido por laser e sua aplicação na detecção de biomarcadores de células RKO-AS45-1 por análises multivariadas

Abstract

O câncer colorretal representa um desafio crescente à saúde pública, exigindo estratégias diagnósticas mais acessíveis, seletivas e adaptáveis à heterogeneidade tumoral. Neste contexto, biossensores eletroquímicos do tipo point-of-care vêm se consolidando como ferramentas promissoras para a detecção de biomarcadores, especialmente quando integrados a plataformas condutoras de baixo custo e alta reprodutibilidade. Este trabalho apresenta o desenvolvimento de um imunossensor impedimétrico utilizando eletrodos de grafeno induzido por laser, funcionalizados com filmes por eletropolimerização de poli(4-hidroxifenilacético) e anticorpos policlonais específicos para biomarcadores da linhagem celular RKO-AS45-1. A plataforma foi fabricada a partir de filmes de poliimida, convertidos termicamente em estruturas grafíticas por irradiação laser. Os eletrodos resultantes apresentaram morfologia porosa, alta condutividade e excelente estabilidade eletroquímica. A funcionalização da superfície e imobilização covalente de anticorpos via química EDC/NHS possibilitou a construção de um imunossensor com resposta sensível à presença dos biomarcadores tumorais. A detecção foi realizada por espectroscopia de impedância eletroquímica, cujos espectros foram interpretados por meio de análise estatística multivariada. A aplicação combinada de Análise de Componentes Principais e Análise Discriminante Linear, com validação cruzada, permitiu a classificação precisa de amostras controle positivo, negativo e interferente, atingindo 100% de acurácia nos grupos extremos. Os resultados confirmam a viabilidade de agrupar superfícies condutoras obtidas por manufatura a laser à modelagem estatística como ferramenta para o desenvolvimento de biossensores específicos, robustos e adaptáveis a diferentes perfis de biomarcadores tumorais, com potencial aplicação em contextos clínicos descentralizados.